As imagens tridimensionais e de alta resolução da atividade enzimática na amostra de tecido ou em todos os membros agora são possíveis-obrigado às moléculas de busca como âncoras de tinta fluorescente no tecido de que as enzimas são ativadas pelas enzimas. O órgão mapeado é tornado transparente por um processo de limpeza. Como uma equipe japonesa relata no diário Química aplicadaPermite a diferença na diferença entre as atividades dos aminopipos e os efeitos dos inibidores no rim do rato.
As enzimas desempenham um papel importante no controle de atividades fisiológicas e atividade enzimática anormal está relacionada a várias condições patológicas. A atividade enzimática varia dos membros para os membros, bem como em diferentes regiões de um único órgão. Dessa maneira, a imagem específica da atividade enzimática em tecidos com resolução espacial detalhada será informativa. Infelizmente, há uma falta de técnicas apropriadas. A imagem da atividade enzimática é originalmente acionada com a sonda de fluorosene. No entanto, as luzes fluorescentes mal entram nos tecidos, portanto, amostras maiores como todos os membros não podem ser mapeadas em 3D. Um processo conhecido como compensação pode ajudá -lo. A limpeza é um processo de maré tradicional através do qual as amostras de tecido são extremamente transparentes com diferentes solventes e reagentes – mantendo sua estrutura. No entanto, durante a lavagem intensiva, pequenas moléculas como sondas fluorescentes também são lavadas do tecido.
Uma equipe liderada por Shinsuke Sando da Universidade de Tóquio agora criou um novo método para ilustrar a atividade de uma enzima em 3D de alta resolução em todo o órgãos claros. Por exemplo, eles escolheram os aminopíticos N (APN), uma enzima dividida peptídica que desempenha um papel importante no desenvolvimento de tumores e tumores. Seu sucesso se deve a uma molécula de sonda especialmente desenvolvida que consiste em corante fluorescente (BDP), uma “unidade de ancção” e um grupo de aminoácidos (alanina).
Se um APN ativo não estiver presente, a investigação permanecerá inalterada e o tecido é lavado durante o processo de limpeza. Em áreas de órgãos com APN ativo, a enzima ativa a unidade âncora e divide o grupo de aminoácidos da investigação. Está conectado às proteínas nas áreas circundantes e ancora a sonda fluorescente na estrutura do tecido circundante, para que não a lave. Ele permite que a equipe obtenha o mapa 3D de atividades de alta resolução e APN com microscopia de fluorocense em todo o rim do mouse. Os pesquisadores também foram capazes de imaginar as diferenças entre as atividades da APN dentro de uma estrutura tubular separada dentro do rim.
A equipe também estudou os efeitos dos inibidores da APN. Eles monitoraram vários padrões para suprimir os fluorocens entre a actinononina anti -agente experimental e outro inibidor da APN. Essas diferenças podem resultar na diferença no metabolismo, metabolismo e/ou farmacocinética. A nova tecnologia de imagem abre caminho para um método de avaliação neutra para o desenvolvimento de medicamentos que não ignoram os pequenos eventos que ocorrem em níveis celulares nos membros.
